主要研究方向
梁爱华教授课题组

科研方向1:原生动物细胞分子生物学

    以原生动物纤毛虫为材料,研究与细胞分裂、物质运输、新生肽链合成的终止与释放等细胞内重要生命活动过程相关蛋白的基因克隆、表达、纯化。利用 RNA 干扰、免疫荧光等技术研究其基因表达产物在细胞内的定位,探讨这些蛋白在细胞中的功能。主要研究低等真核生物肽链释放因子与蛋白质合成过程中终止密码的识别机制;研究以内吞与胞吐为主要物质交换方式的单细胞真核生物中囊泡转运信号蛋白基因的分化程度及其基因产物 RabGTPase 在囊泡转运过程中的功能;研究纤毛虫大核特定序列的识别和基因删除机制。研究细胞分裂相关蛋白如中心蛋白、微管蛋白的结构与功能等。

    目前已克隆了 4 种两类肽链释放因子基因,在大肠杆菌中进行了表达,同时,通过定点突变、酵母双杂交,体外 Pull Down 等技术研究两类释放因子的相互识别与作用;已克隆了 20 多种 RabGTPase 基因,通过比较大核、小核及 mRNA 水平上不同 RabGTPase 基因表达,确定了该类基因的部分内部删除序列;与清华大学合作获得了第一类释放因子和中心蛋白的晶体;制备了肽链释放因子、中心蛋白、 RabGTPase 等 5 种不同的抗体,开展这些蛋白在细胞中的定位研究,对研究蛋白 - 蛋白、蛋白 - 核酸的相互作用,阐明真核生物肽链合成终止过程中释放因子识别终止密码的机理及其作用机制,探讨囊泡转运信号蛋白 RabGTPase 在细胞中的功能等具有重要的意义。

   相关国家基金项目有:

   1)国家自然科学基金,纤毛虫遗传密码子表达特点的研究, 1996-1998 , 10 万元,主持人,梁爱华。项目编号: 39570093

   2)国家自然科学基金,纤毛虫释放因子结构及其终止密码识别机制, 2003.1-2005.12 , 22 万元,主持人,梁爱华。项目编号: 30270204

   3)国家自然科学基金,纤毛虫 RabGTPase 基因分析和细胞定位 , 2004.01-2006.12, 20 万元,主持人,王伟。 项目编号: 30300038

   4)国家自然科学基金项目,肽链释放因子在细胞有丝分裂中的功能, 2005.01-2007.12 , 1.8 万元, 24.00 万元,主持人,柴宝峰。项目编号: 30470239

科研方向2:植物抗虫基因工程

    分离克隆具有抗虫功能的基因,构建含单价、双价、多价抗虫基因的重组质粒,转化不同植物,筛选抗虫新品种。目前已将蝎昆虫毒素基因和几丁质酶基因等具有抗虫功能的基因,克隆到不同植物表达载体中,构建了多种重组质粒。与山西省农科院合作,利用农杆菌介导等方法将重组质粒导入 多种植物 (油菜、棉花、玉米、烟草、杨树等),筛选抗虫新品种。

    同时,将东亚钳蝎昆虫特异性神经毒素基因与一种昆虫几丁质酶基因克隆到一个可转化昆虫细胞的中间载体中,获得含双价抗虫基因的重组质粒,并将该重组质粒与苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 AcNPV 基因组 DNA 共转染昆虫细胞中,获得含双价抗虫基因的重组杆状病毒。利用该重组杆状病毒开发新型生物杀虫剂。该项目已申请国家发明专利,公开号为 CN1597938 。

    相关重点基金项目有:

    国家自然科学基金,双价抗虫基因植物表达载体的构建, 2000-2002 , 14 万元,主持人,梁爱华。项目编号: 39970416

    山西省科技厅攻关项目,新型重组杆状病毒生物杀虫剂开发( 031010 ), 2003-2005 , 15 万元,主持人,梁爱华。

    山西省留学基金,含双价抗虫基因重组杆状病毒构建与应用。 2005-2007 , 8 万元,主持人,梁爱华。
袁静明教授课题组
    1)重症肌无力治疗战略的研究:乙酰胆碱受体 a 亚基功能区的克隆, 表达 , 纯化及免疫活性 (国际合作项目)

    Therapeutic Strategies of Myasthenia Gravis: Cloning, expression, purification and immuno-reactivity for the functional region of acetylcholine receptor alpha-subunit (International collaboration)

   乙酰胆碱受体 (Acetylcholine receptor, AChR ) 是一种配体介导的离子通道蛋白,由 2 a ,β,γ(ε),δ 共 5 个亚基组成。其中成熟的 a 亚基 是自身免疫病重症肌无力 ( Myasthenia Gravis, MG ) 的主要免疫原,肌无力患者由于自身免疫系统的紊乱,体内产生了非正常的乙酰胆碱受体抗体 (anti-acetylcholine receptor antibodies, AChRAb ), 减少功能性乙酰胆碱受体数量 ,抑制乙酰胆碱受体与乙酰胆碱结合,阻碍骨骼肌间神经传导。本实验室与德国 Kaiserslautern 大学 Trommer 教授合作探索重症肌无力的发病机理及可能治疗方法 . ???

    2)内蛋白子介导合成 AChR a211 -Gelonin 免疫络合物国家自然科学基金 No.30270292

      重症肌无力是一种乙酰胆碱受体抗体介导的自身免疫疾病。免疫毒素 AChR a 211 -Gelonin 既可与肌无力患者体内靶细胞上 AChR 抗体结合 , 又能发挥毒杀作用 , 有望作为一种特殊治疗剂用于肌无力患者 内蛋白子 Intein 是 一种蛋白质自剪切元件,在后转译水平上 从前体蛋白质上剪切下来 , 使得相伴其两侧的外蛋白子 ( extein) 的 C 端区和 N 端区连接 , 产生两个新的蛋白质。 本项目应用内蛋白子intein 介导的蛋白质连接 (IPL) 原理 , 一步获得免疫毒素 AChR a 211 -Gelonin.

    3)PICK1 和 BAR 结构域的高表达及理化性质研究 ( 国家自然基金 No:30400065)

    High expression and physicochemical properties of PICK 1 and its BAR domain ( NSFC Project No:30400065)

    本项目旨在克隆、表达和纯化 PICK1 及其 C 端 BAR 结构域。优化重组子达到高表达、可溶性。应用核磁共振、 CD 、荧光、分子排阻层析以及共聚焦激光扫描显微镜等手段,开展 PICK1 和 BAR 结构域的理化性质研究,探讨在体外及体内环境中 PICK1 蛋白和 NSF 、 SNAP 等蛋白相互作用以及脂类对于它们相互作用的可能影响 , 为进一步了解突触可塑性的分子机理,以及 PICK1/AMPA 受体复合物和蛋白定位机器关系 , 提供科学依据。

    4)D- 海因酶等亚酰胺水解酶的基因克隆、酶结构及其应用(省级项目)

   Gene cloning, enzyme structure and potential applications of some of imidases such as D-hydantoinase and so on ( province projects)

   本室长期从事酶的结构与功能研究。先后开展过葡萄糖淀粉酶、青霉素酰化酶、植酸酶、超氧化物歧化酶、 DNA 聚合酶等工作。目前着重研究能水解亚酰胺键的几种蛋白酶的基因克隆、酶的结构与功能、酶的定向进化及其应用。如 D- 海因酶、 N- 氨甲酰 -D- 氨基酸酰胺水解酶、低分子量亚酰胺酶及脱乙酰基酶等。
赵良启教授课题组
科研方向一:多聚羟基烷酸的发酵生产工艺及应用开发研究

    多聚羟基烷酸是一类由原核生物合成的新型热塑材料,具有生物可降解性、生物相容性、生物可再生性、降解产物无毒性及表面可修饰性等优良特性,属典型的环境友好型新材料。 PHAs 不仅可以替代传统石化塑料,消除白色污染,更可以应用于医疗与医学组织工程方面,如作为手术缝合线、伤口覆膜、各种医疗器械、克隆器官支架和靶向药物缓释剂的制作材料,有着诱人的应用前景。英、美、日等国对于 PHAs 的研究开展较早,已经有多聚羟基丁酸和羟基丁酸与羟基戊酸共聚体等产品投放市场。目前世界各国对于 PHAs 的研究主要集中在开发生产菌株、构建基因工程菌、探索代谢途径及调控机理、创建生产方法与技术、测定产品结构与性能和拓宽应用范围等方面。我们是从 1994 年开始这项研究工作的,最初与中国农大李季伦院士合作,后单独立项,已开发出羟基丁酸与羟基己酸共聚体和羟基丁酸与羟基辛酸共聚体两种 PHAs 新产品,申请发明专利两项,在国内外发表文章多篇,研究水平基本与国外同步。

科研方向二:细菌多糖的发酵生产及应用开发研究

    当前,生命科学的研究已经进入了系统生物学时代,继核酸和蛋白质之后,对于生物物质的研究已拓宽到了多糖方面。多糖与受精、发育、分化、免疫、抗肿瘤、抗辐射等许多生命现象有关,因此研究多糖具有重要的理论意义。近年来,越来越多的多糖被开发出来,分别作为免疫功能增强剂、食品添加剂、增稠剂、凝固剂、絮凝剂、润滑剂等应用于多个领域,在经济建设与人民生活中发挥着重要作用。迄今为止,对于真菌多糖的研究较多,如灵芝多糖、香菇多糖等,但对于细菌多糖的研究不多。我们分离获得一株产多糖能力较强的细菌,对其产生的多糖的生物学特性、结构与功能、发酵生产工艺及其应用技术进行了研究,已发表论文两篇,申请发明专利一项。

科研方向三:山西老陈醋传统工艺的发掘、优化与规范

    山西老陈醋作为我国的四大名醋之一,产品质量优良、驰名中外,深受消费者喜爱,然而其生产工艺落后,经济效益欠佳。深入研究山西老陈醋大曲微生物的群落结构、功能菌株及代谢过程与调控机理是提高与发展山西老陈醋生产技术的根本途径。近年来,我们已经对山西老陈醋的功能微生物、群落结构、酿造工艺、有效成分进行了初步研究,并取得了一些进展,正在采用 DNA 指纹图技术与代谢分析技术进行山西老陈醋代谢工程方面的研究。

    在研项目:

    1) 羟基丁酸和羟基辛酸共聚体的性能及其在骨移植和药物缓释方面的应用基础研究,国家自然科学基金资助, 25 万元。

    2) 聚羟基烷酸靶向抗癌药物缓释纳米微球的研发,山西省科技攻关项目, 15 万元。

    3) 应用生物技术开发细菌免疫多糖新产品的研究,山西省教育厅资助, 2 万元。

王伟教授课题组

科研方向:细胞分子生物学

    纤毛虫是一类单细胞真核生物。 利用纤毛虫为材料,在分子生物学领域取得了许多突破性的研究成果,如动力蛋白和核酶的发现 , 端粒结构和端粒酶的鉴定 , 遗传密码识别的改变 , 组蛋白的修饰等重要的生命现象。在细胞结构上,这类单细胞生物含有两种核,大核和小核, 游仆虫的大核基因组几乎全部为可表达的功能基因,每个基因两端含有特异的端粒结构,可以方便建立起类似高等真核生物的 cDNA 文库。特定探针能够在文库方便筛选目的基因,兼并性引物亦可以从大核 DNA 方便扩增目的基因,因此游仆虫是克隆重要功能蛋白的很好材料。 我们的研究主要以八肋游仆虫为材料,开展下面的研究:

   1)基因重排机制

    纤毛虫具有大核和小核两种细胞核。二倍体小核起保存和传递遗传信息的作用,多倍体的大核负责无性繁殖时基因的转录与表达。有性生殖过程中,新的大核由小核合子核分裂产物之一发育而来。在小核向大核发育过程中,小核内的 DNA 进行一系列的程序化的基因重组,包括小核染色体的断裂、间隙片段 IES 的删除,大核特异序列 MDS 的重排和拼接。

纤毛虫整个基因组范围的 IES 删除的确切分子机制仍不清楚。 在游仆虫、尖尾虫等纤毛虫大核发育过程中,约 90-95% 的 IES 被删除,这种特殊现象使游仆虫更适合于研究基因组分子重排的分子机制。

   2)重要功能基因的克隆鉴定

    构成原生动物的这个细胞在结构与机能上分化的多样性及复杂性是多细胞动物中任何一个细胞无法比拟的,所以从细胞水平上说,构成原生动物的细胞是分化最复杂的细胞。四膜虫基因组测序计划已经完成 , 估计在这种单细胞生物中含有约 2,6000 种基因,因此单细胞的原生动物是丰富的功能基因库。

    控制细胞囊泡运输的 Rab 蛋白、蛋白合成终止的肽链释放因子、微管组织中心的中心蛋白的结构和功能在该类生物中有着区别于高等真核生物的特征,因此对该类生物的研究,有助于阐明细胞的基本生命活动规律。

    在研项目 :

     1)纤毛虫 Rab 蛋白的基因分析与细胞定位,国家自然科学基金,主持人

     2)淡水游仆虫 RabGTPase 家族基因的克隆与鉴定,国家重点实验室开放课题,主持人

     3)细胞内膜转运分子开关 RabGTPase 的研究,山西省青年基金,主持人

     4)蝎毒素抗肿瘤基因工程研究,山西省基础研究项目,主持人
王转花教授课题组

   1)植物蛋白酶抑制剂与基因工程药物(山西省科技厅及太原市科技局攻关项目)

   利用生物技术研制新型的抗癌、抑癌药物是当今国内外新药研发的主要方向,目前我国的这类药物大都是进口或少量的仿制产品。现国外此类药物的专利许可费至少在千万美元之上,加快研制出具有我国资源优势和自主知识产权的抗癌、抑癌类新药物十分必要。

   近年来,蛋白酶抑制剂在抗肿瘤细胞生长方面的作用越来越被人们所认识。我们的前期工作已经揭示来自荞麦的天然蛋白酶抑制剂和基因重组蛋白酶抑制剂都具有抑制血液病肿瘤细胞生长和促凋亡的作用,对正常血细胞生长无不良影响。 本项目将进一步研究重组荞麦蛋白酶抑制剂在抑制不同肿瘤细胞凋亡的作用机理以及药理和药效学作用,并参照生物工程药物的规范化要求建立与 FDA 、 WHO 接轨的产品质量标准和检验方法。

   2)荞麦过敏原的分子特征及其致敏机理研究(国家自然科学基金项目)

   荞麦属于蓼科植物,有甜荞 (common buckwheat ) 和苦荞 (tartary buckwheat ) 两个栽培品种。随着人们对荞麦资源的营养和医药学功能的逐渐认识 , 荞麦食产品供需空间在逐渐增大 , 有关荞麦资源的生物活性物质 , 尤其与人类健康关系密切的过敏原的研究 , 已成为荞麦研究领域的热点。开展荞麦过敏蛋白等重要功能蛋白及基因的生化与分子生物学、免疫学等方面的研究,分析荞麦过敏原的抗原决定簇,对于揭示荞麦过敏蛋白的致敏机制、结构与功能的关系,对 过敏蛋白基因进行分子改造和育种改良 具有重要的理论意义和应用前景。 本项目将采用突变技术及随机肽库筛选技术, 对已获得的荞麦过敏蛋白的分子特性及表位研究, 确定具有免疫原性的功能区域。 通过特异性 IgE 抗体生物学活性鉴定,筛选出含 TBa 表位区域的突变体,进行结构与功能及致敏机理的研究。

   3)室内外环境污染及过敏与哮喘(国际合作项目)

   本项目由瑞典研究委员会( Swedish Research Council )资助开展 Asthma and allergy in China and Sweden---Indoor and Outdoor Environment 研究。主要由课题组负责人 王转花 教授同瑞典 Uppsala 大学环境医学系 Dr. D. Norb?ck 教授和 Dr. G. Wieslander 教授合作,在太原市和 Uppsala 分别开展大气污染和食物有关的哮喘、湿疹等过敏性疾病情况的调查研究。并在太原市区和郊区对大、中、小学生所生活的环境进行取样分析。大气污染物的仪器分析工作在 Uppsala 大学进行。 该项目旨在通过跟踪室内外环境及人类过敏与哮喘之间的关系,确定引起过敏的主要原因,提出可能的监测方法及预防措施。